傳統膠原蛋白從動物結締組織中提取獲得，提取方法主要包括高壓輔助的物理方法、溶劑抽提的化學方法、酶的生物化學法。但以上方法提取出來的膠原蛋白存在動物源疾病等風險。而重組膠原蛋白具有更好的生物相容性和更低的免疫原性。此外，重組膠原蛋白變形溫度在72℃以上，遠高于動物源膠原蛋白的40℃，更易運輸和儲存，在醫美行業中使用更為廣泛。重組表達系統包括如大腸桿菌、酵母、動物細胞、轉基因動物和轉基因植物等。但以大腸桿菌和酵母為體系生產出來的膠原蛋白容易出現氨基酸序列簡單重復，無羥基化修飾等問題，在常溫條件下其三螺旋結構松散，甚至呈現出單鏈線性結構。

CHO細胞作為***具代表性的動物細胞表達系統，具有準確的重組蛋白翻譯后修飾，表達出的蛋白在理化特性和生物學功能***接近天然蛋白。在生產重組蛋白藥物生產中有著悠久的歷史。CHO細胞表達的重組膠原蛋白能完美還原天然膠原蛋白的三螺旋結構，即使在常溫條件下其三螺旋結構仍能緊密維持。

從SDS-PAGE結果可以看出，CHO A222細胞可表達185 KDa大小的單鏈α1 (IV) （圖2.F）。同樣，在CHO A222細胞的培養基上清中可檢測到有185 KDa的大小的α1 (IV) （圖2.G）。Control CHO MT7細胞未合成α1 (IV) 或α2 (IV)（圖2.A&D）。另外，表達的α1 (IV) 應該是單鏈結構，因為在圖2.B&E中未見更大分子量的蛋白存在。這些結果表明CHO A222細胞產生的單鏈α1 (IV) 會外泌出細胞。CHO MT7細胞在感染后會表達出170 KDa的單鏈α2 (IV) ，但不會形成三聚體 (data not shown) 。CHO A222-A2細胞可同時表達α1 (IV) 和α2 (IV)（圖2.C、F、H），此外，在lane C和F的非還原條件中出現***條大于300 KDa的條帶，但在還原條件下（圖2.H）此條帶消失且170 KDa條帶增強。此條帶只在CHO A222-A2細胞中產生，且在經過膠原蛋白酶處理后與α1 (IV) 和α2 (IV) 條帶均消失，因此可以確定CHO A222-A2細胞表達出IV型膠原蛋白，且后續實驗也有進***步驗證 (data not shown) 。

膠原蛋白的羥基化修飾對維持膠原蛋白的穩定性有重要作用，在斯坦福大學Marinkovich教授等人著作專利中[3]，研究人員將編碼脯氨酰4-羥化酶 (prolyl 4-hydroxylases, P4Hs) 的質粒經電轉轉進CHO細胞中，并挑選出穩轉CHO細胞株。

CHO細胞在無選擇壓力情況下，培養至20代時，VII型膠原蛋白仍能穩定表達，這將有利于重組膠原蛋白的GMP生產（圖4）。